酶解时碳酸氢氨的浓度一般在10~50mM之间。碳酸氢氨的作用主要是提供一个碱性的水解环境,因为Trypsin的活力在pH8~9之间最高。最常用的碳酸氢氨浓度有20mM,40mM。盐浓度过大时,后续的冻干过程中会有较多的盐析出;盐浓度过小时,则不能有效的提供碱性pH的水解环境(尤其是在样品的pH值低,而且体积大时)。为了确定酶解体系的pH值。
Trypsin在pH8~9活力最高,所以为了防止酶的自水解,Trypsin母液要处于一个酸性的环境里以便长期保存。Trypsin储存液的pH大约是5.3,是用来稀释母液用的。如果所需的酶量较大,可以直接用碳酸氢氨溶液来稀释母液。如果酶解的样品少,可以用储存液来稀释,这样剩余的酶液可以在-800C保存到下次使用。
碳酸氢氨、碱性、自水解、酶液、母液
http://www.biox.cn/content/20050426/12385.htm


