室町时代（むろまちじだい 1333年－1568年），是日本史中世时代的一个划分。
足利氏原是上野国豪族，而且更是镰仓幕府将军源赖朝同族，足利尊氏在京都的室町开设幕府，是为室町幕府。
南北朝的统一是第三代将军足利义满进行的,义满稳定了京都的幕府以后，曾企图篡夺皇位。但在他死后，第四代将军足利义持阻止了此事。在2个多世纪内在政治、文化方面，武家都压倒公家，处于优势。由于室町幕府是聚集了各有力大名而建立的，因此幕府本身的统治能力薄弱。应仁元年（1467年）一月，在第八代将军足利义政在位，因继承权问题而爆发了应仁之乱，自此幕府的权威日下。原本受幕府策封于各地的守护大名，有的渐渐被守护代(副官)、家臣、国人篡夺政权，有的可以保持政权至战国时代。从应仁之乱开始，至足利幕府灭亡，人称战国时代。
在京都中，幕府的权威日渐衰落，被管领细川家所干涉、拥立。第十三代将军足利义辉被杀，他的弟弟足利义昭被织田信长拥立，后因与信长作对而被流放，幕府灭亡，正式进入安土桃山时代。
室町时代的文化方面，无论是贵族还是武家的文化，都受到禅宗的影响。14世纪末期以金阁寺为代表的北山文化及15世纪末期以银阁寺为代表的东山文化都十分发达。16世纪中叶，葡萄牙人、西班牙人来到日本，传入了枪炮和基督教。那是文化方面充满生气的时代。
尊氏对应后醍醐的南朝建立了北朝，于1336年建立室町幕府。两个朝廷对立的南北朝时代一直持续到公元1392年，最后被北朝统一。以应仁之乱为契机日本进入了战国时代。虽然战乱持续但内外通商繁盛，农业、工业技术也有所提高。同时此时的倭寇袭击了朝鲜和中国。