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也称定组成定律。其内容为：一种化合物，不论是天然存在的还是人工合成的，不论是用哪种方法制备的，它的化学组成总是确定的，例如，二氧化碳分子中碳和氧的质量比总是3:8,或者说它的组成总是含碳27％、含氧73％。因为二氧化碳分子由 1个碳原子和两个氧原子组成,它的分子式是CO2，碳和氧的原子量都是定值，所以二氧化碳中碳、氧质量比总是确定的。
“一种化合物的组成是不是一定的?” 这个问题在18和19世纪之交曾有过激烈的争论,以C.-L.贝托莱为代表的一派主张，化合物的组成可随制备条件而异；而以J.-L.普鲁斯特为代表的一派则主张,纯化合物中各元素的质量比是确定的。普鲁斯特和其他许多化学家以大量实验数据论证了定比定律，J.道尔顿根椐这些事实提出了原子论，从此定比定律得到了化学家的普遍承认。
随着科学的发展，现在对化合物的定义已有所扩大。有一些化合物的组成在小范围内是可以改变的。例如γ黄铜的理想组成(符合定比定律)是Cu5·Zn8，相当于含62％的Zn，事实上γ黄铜的含锌量可在59％～67％连续变化。这是因为晶格点上一些铜原子为锌原子所置换,或锌原子为铜原子所置换。现在把这类化合物叫非化学计量化合物，而把符合定比定律的叫化学计量化合物。
